Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
TrxR1 Plasmide Double Nickase (h): sc-400994-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TrxR1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TrxR1 Double Nickase Plasmid (h) e il TrxR1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TXNRD1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: TrxR1 Antibody (B-2): sc-28321
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TrxR1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400994-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TrxR1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400994-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TXNRD1 umano codifica la tioredossina reduttasi 1 (TrxR1), una selenoenzima citosolica che utilizza NADPH per ridurre la tioredossina e mantenere l’omeostasi tiolo–disolfuro. TrxR1 sostiene le difese antiossidanti e la segnalazione redox mantenendo la tioredossina in forma ridotta per il riciclo delle perossiredossine, la sintesi del DNA tramite la ribonucleotide reduttasi e il controllo redox dei fattori di trascrizione. Attraverso l’integrazione con le vie dipendenti da glutatione e tioredossina, TXNRD1 influenza le risposte cellulari allo stress ossidativo, alla proteostasi e all’apoptosi. Un’attività dis-regolata di TXNRD1/TrxR1 è spesso studiata in contesti quali l’adattamento redox dei tumori, l’infiammazione e la neurodegenerazione, dove sono marcati lo squilibrio redox e la segnalazione da stress.
TrxR1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TXNRD1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TXNRD1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TXNRD1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TXNRD1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.