Plásmido Doble Nickase (h) TRIM69: sc-404906-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)TRIM69 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TRIM69 (h) y el plásmido de doble nickasa TRIM69 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TRIM69. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) TRIM69 | sc-404906-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) TRIM69 | sc-404906-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TRIM69 codifica una ligasa E3 de ubiquitina de la familia de motivos tripartitos (TRIM), implicada en la regulación dependiente de ubiquitina de la estabilidad de proteínas y de la señalización. Como proteína con dominios RING–B-box–coiled-coil, TRIM69 se asocia con el control inmunitario innato de las respuestas antivirales y con la modulación de vías relacionadas con el interferón, influyendo en el recambio o la actividad de intermediarios clave de señalización. Los programas alterados de ubiquitinación de la familia TRIM pueden remodelar la señalización inflamatoria, las respuestas al estrés y las transiciones de estado celular, lo que hace a TRIM69 relevante para estudios mecanísticos de regulación inmunitaria e interacciones huésped–patógeno. La desregulación de los circuitos de ubiquitina asociados a TRIM69 también se ha explorado en contextos en los que una proteostasis aberrante y la señalización inmunitaria contribuyen a fenotipos de enfermedad.
TRIM69 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TRIM69 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TRIM69. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TRIM69. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TRIM69 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.