Tns2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411726

Descripción general

TNS2 codifica la tensina-2 (Tns2), un adaptador citosquelético asociado a las adhesiones focales que conecta los receptores de integrinas con la red de actina y organiza la señalización en los sitios de contacto célula–matriz. A través de sus dominios modulares, Tns2 coordina el ensamblaje y el recambio de los complejos de adhesión y modula vías implicadas en el extendido celular, la migración y la mecanotransducción, incluidas la señalización dependiente de fosfoinosítidos y los eventos acoplados a receptores tirosina quinasa. La alteración de la función de TNS2 se ha asociado con una desregulación de la señalización de adhesión y de la homeostasis tisular, con especial relevancia para la biología glomerular renal y la integridad de los podocitos. Estas propiedades hacen de TNS2 un nodo útil para estudiar la señalización impulsada por la adhesión, la remodelación del citoesqueleto y los cambios dependientes del contexto en la invasividad y la diferenciación celulares.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Tns2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TNS2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TNS2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TNS2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Tns2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TNS2 para la investigación de la señalización de Tns2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TNS2 críticos para la función de Tns2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TNS2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Tns2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Tns2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TNS2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Tns2 (h) y el plásmido HDR Tns2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TNS2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TNS2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.