TNF alpha Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400124-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TNF alphaO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TNF alpha (h) e o Plasmídeo Double Nickase TNF alpha (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TNF. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TNF alpha Anticorpo (C-4): sc-133192
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TNF alpha Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400124-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TNF alpha Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400124-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **TNF** codifica o fator de necrose tumoral alfa (**TNFα**), uma citocina pró-inflamatória pleiotrópica produzida principalmente por macrófagos e células T ativados, que coordena respostas imunes inatas e adaptativas. O TNFα sinaliza por meio de **TNFR1** e **TNFR2** para regular as cascatas canônicas de **NF-κB** e **MAPK**, ao mesmo tempo em que também influencia a apoptose e a necroptose, dependendo do contexto do receptor e do recrutamento de adaptadores a jusante. Essas vias moldam redes de citocinas, o recrutamento de leucócitos, a ativação endotelial e o remodelamento tecidual em resposta a infecção ou lesão. A atividade desregulada do TNFα é amplamente utilizada como um indicador molecular em estudos de inflamação crônica e de patologia mediada pelo sistema imune, incluindo autoimunidade, biologia da doença inflamatória intestinal e sinalização no microambiente tumoral.
TNF alpha O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TNF em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TNF. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TNF. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TNF interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.