TIP30 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406742
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- TIP30 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico TIP30, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TIP30 Anticuerpo (F-10): sc-515728
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
TIP30 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406742 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
HTATIP2 codifica TIP30 (también conocida como CC3), una proteína citoplasmática y nuclear implicada en la regulación de programas de transcripción y de la homeostasis celular. TIP30 se ha relacionado con el control de la apoptosis, la modulación del transporte núcleo-citoplasmático y la regulación de vías de tráfico endocítico que influyen en el recambio de receptores y en la señalización de factores de crecimiento. Se han descrito alteraciones en la expresión de HTATIP2/TIP30 en múltiples contextos tumorales, y se estudia su asociación con la proliferación celular, la invasión y fenotipos metastásicos. Estas propiedades hacen de TIP30 una diana útil para desentrañar redes de señalización que conectan respuestas al estrés, tráfico intracelular y regulación génica en células humanas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO TIP30 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen HTATIP2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del HTATIP2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de HTATIP2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TIP30.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en HTATIP2 para la investigación de la señalización de TIP30, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de HTATIP2 críticos para la función de TIP30
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de HTATIP2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido TIP30 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TIP30 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus HTATIP2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TIP30 (h) y el plásmido HDR TIP30 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología HTATIP2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana HTATIP2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.