TIG2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-403443

Panoramica

RARRES2 codifica il gene 2 indotto dal tazarotene (TIG2), noto anche come chemerina, un’adipochina secreta e chemiotattico che segnala principalmente attraverso CMKLR1 e recettori correlati per coordinare il traffico dei leucociti e la sorveglianza immunitaria dei tessuti. TIG2 influenza le cascate infiammatorie, la differenziazione degli adipociti e l’omeostasi metabolica, collegando la biologia del tessuto adiposo alla segnalazione dell’immunità innata e alla funzione endoteliale. Un’espressione deregolata di RARRES2/TIG2 è stata associata a infiammazione cronica e disturbi metabolici ed è stata studiata in contesti quali obesità, insulino-resistenza e fisiopatologia cardiovascolare. In biologia dei tumori, la segnalazione della chemerina è oggetto di studio per i suoi ruoli nel modellare il microambiente tumorale e nel modulare il reclutamento delle cellule immunitarie.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO TIG2 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene RARRES2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del RARRES2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto RARRES2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina TIG2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di RARRES2 per lo studio della segnalazione di TIG2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni RARRES2 critici per la funzione di TIG2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di RARRES2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal TIG2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal TIG2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus RARRES2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal TIG2 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR TIG2 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia RARRES2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio RARRES2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.