Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Testican-1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406915
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Testican-1 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico Testican-1, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Testican-1 Antibody (C-3): sc-390789
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Testican-1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-406915 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
SPOCK1 codifica la testicana-1, un proteoglicano secreto della matrice extracellulare appartenente alla famiglia SPARC, che modula le interazioni cellula–matrice e la proteolisi pericellulare. La testicana-1 può influenzare il rimodellamento extracellulare interagendo con componenti a base di eparan/condroitin solfato e regolando l’attività delle proteasi, incidendo così su adesione cellulare, migrazione e organizzazione tissutale. Attraverso questi processi dipendenti dalla matrice extracellulare, SPOCK1 è stato studiato in contesti di comportamento cellulare invasivo, rimodellamento stromale e microambienti infiammatori. Un’espressione deregolata di SPOCK1 è stata riportata in molteplici tipi di tumore e in patologie fibrotiche o associate al rimodellamento, a supporto del suo impiego come nodo meccanicistico per indagare fenotipi guidati dal microambiente.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Testican-1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene SPOCK1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del SPOCK1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto SPOCK1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Testican-1.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di SPOCK1 per lo studio della segnalazione di Testican-1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni SPOCK1 critici per la funzione di Testican-1
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di SPOCK1 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal Testican-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal Testican-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus SPOCK1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal Testican-1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR Testican-1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia SPOCK1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio SPOCK1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.