Synaptogyrin-2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-423239

Panoramica

Syngr2 codifica la sinaptogirina-2, una proteina di membrana delle vescicole sinaptiche a quattro domini transmembrana, arricchita nei terminali presinaptici, dove contribuisce all’organizzazione delle vescicole e alla dinamica del rilascio dei neurotrasmettitori. La sinaptogirina-2 partecipa al ciclo delle vescicole sinaptiche, influenzando l’accoppiamento tra esocitosi ed endocitosi e il traffico vescicolare nelle cellule neuronali e neuroendocrine. Grazie al suo ruolo nella regolazione della disponibilità delle vescicole e della probabilità di rilascio, i meccanismi legati a SYNG2 sono rilevanti per gli studi sulla plasticità sinaptica e sul funzionamento dei circuiti. Un’alterata gestione presinaptica delle vescicole è una caratteristica ricorrente in modelli di disturbi del neurosviluppo e neurodegenerativi, rendendo Syngr2 un bersaglio utile per indagini meccanicistiche sulla disfunzione sinaptica.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Synaptogyrin-2 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Syngr2 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Syngr2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Syngr2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Synaptogyrin-2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Syngr2 per lo studio della segnalazione di Synaptogyrin-2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Syngr2 critici per la funzione di Synaptogyrin-2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Syngr2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Synaptogyrin-2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Synaptogyrin-2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Syngr2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Synaptogyrin-2 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Synaptogyrin-2 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Syngr2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Syngr2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.