SULT2A1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423184

Descripción general

El gen murino **Sult2a1** codifica la sulfotransferasa citosólica **SULT2A1**, una enzima que cataliza la sulfonación dependiente de **3′-fosfoadenosina-5′-fosfosulfato (PAPS)** de los hidroxiesteroides y de los intermediarios de ácidos biliares. Esta reacción de conjugación de fase II modula la biodisponibilidad de esteroides y oxisteroles, facilita la desintoxicación y contribuye a la homeostasis metabólica hepática e intestinal. La actividad de SULT2A1 se integra con las vías de procesamiento de ácidos biliares y hormonas esteroideas, y puede influir en el metabolismo de xenobióticos mediante una regulación coordinada con programas de receptores nucleares como **FXR** y **PXR**. La alteración de la capacidad de sulfatación es relevante en estudios de estrés colestásico, inflamación hepática y fenotipos endocrinos/metabólicos en modelos murinos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SULT2A1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Sult2a1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Sult2a1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Sult2a1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SULT2A1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Sult2a1 para la investigación de la señalización de SULT2A1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Sult2a1 críticos para la función de SULT2A1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Sult2a1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SULT2A1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido SULT2A1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Sult2a1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SULT2A1 (m) y el plásmido HDR SULT2A1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Sult2a1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Sult2a1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.