Stomatin Plasmide Double Nickase (m): sc-420189-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Stomatin Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Stomatin Double Nickase Plasmid (m) e il Stomatin Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Stom. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Stomatin Plasmide Double Nickase (m) | sc-420189-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Stomatin Plasmide Double Nickase (m2) | sc-420189-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Mouse Stom codifica la stomatina, una proteina integrale di membrana arricchita nelle zattere lipidiche che funge da impalcatura per i microdomini di membrana e modula l’attività di canali ionici e trasportatori. La stomatina partecipa alla regolazione della rigidità di membrana, del traffico vescicolare e della segnalazione meccanosensoriale, con interazioni riportate che influenzano vie collegate all’omeostasi di Na⁺/K⁺ e alla funzione dei canali ionici sensibili agli acidi. In contesti ematopoietici e neurali, le proteine della famiglia della stomatina sono associate all’organizzazione della membrana eritrocitaria e all’eccitabilità dei neuroni sensoriali, rendendo Stom un locus utile per studiare la biofisica delle membrane e la regolazione dei canali. Processi legati alla stomatina deregolati sono stati messi in relazione con fenotipi che implicano un’alterata stabilità di membrana e risposta agli stimoli, a supporto della sua rilevanza in modelli di patologie dei globuli rossi e disfunzioni sensoriali.
Stomatin Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Stom nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Stom. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Stom. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Stom interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.