Plasmide Double Nickase (m) Stomatin: sc-420189-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Stomatin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Stomatin Double Nickase (m) et le plasmide Stomatin Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Stom. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Stomatin | sc-420189-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Stomatin | sc-420189-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène Stom chez la souris code la stomatine, une protéine membranaire intégrale enrichie dans les radeaux lipidiques, qui sert d’échafaudage aux microdomaines membranaires et module l’activité des canaux ioniques et des transporteurs. La stomatine participe à la régulation de la rigidité membranaire, du trafic vésiculaire et de la signalisation mécanosensorielle, avec des interactions rapportées influençant des voies liées à l’homéostasie Na⁺/K⁺ et au fonctionnement des canaux ioniques sensibles aux acides. Dans les contextes hématopoïétique et neural, les protéines de la famille de la stomatine sont associées à l’organisation de la membrane des érythrocytes et à l’excitabilité des neurones sensoriels, faisant de Stom un locus utile pour étudier la biophysique membranaire et la régulation des canaux. Des processus liés à la stomatine dérégulés ont été associés à des phénotypes impliquant une stabilité membranaire altérée et une réponse modifiée aux stimuli, ce qui appuie sa pertinence dans des modèles de troubles des globules rouges et de dysfonctionnement sensoriel.
Stomatin Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Stom dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Stom. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Stom. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Stom.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.