Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Stat6 Plasmide Double Nickase (h): sc-418159-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Stat6 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Stat6 Double Nickase Plasmid (h) e il Stat6 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira STAT6. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Stat6 Antibody (D-1): sc-374021
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Stat6 Plasmide Double Nickase (h) | sc-418159-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Stat6 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-418159-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
STAT6 codifica Stat6, un fattore di trascrizione latente attivato a valle della segnalazione dei recettori per IL-4 e IL-13 tramite le chinasi JAK e la successiva dimerizzazione dipendente dalla fosforilazione e traslocazione nel nucleo. Nel nucleo, Stat6 si lega a elementi regolatori del DNA per controllare programmi genici coinvolti nella differenziazione Th2, nell’attivazione alternativa dei macrofagi, nel rimodellamento epiteliale e nel class switching delle immunoglobuline. Questa via integra i segnali delle citochine con la cromatina e il macchinario trascrizionale, plasmando l’infiammazione allergica e le risposte immunitarie di tipo 2. Un’attività disregolata di STAT6 è implicata nei meccanismi dell’asma e delle malattie atopiche ed è anche studiata nei contesti della polarizzazione immunitaria associata ai tumori e delle transizioni di stato cellulare guidate dalle citochine.
Stat6 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus STAT6 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di STAT6. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di STAT6. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con STAT6 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.