SOCS-5 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-402585

Panoramica

SOCS5 codifica il suppressor of cytokine signaling 5 (SOCS-5), un membro della famiglia SOCS che attenua la segnalazione mediata da citochine e da recettori di fattori di crescita tramite il riconoscimento del bersaglio mediato dal dominio SH2 e il reclutamento, dipendente dal SOCS box, di complessi di ubiquitina ligasi. SOCS-5 è implicato nella regolazione negativa della via JAK/STAT e può modulare vie associate ai recettori collegate all’attivazione delle cellule immunitarie, alle risposte infiammatorie e ai programmi di differenziamento. Controllando ampiezza e durata del segnale, SOCS-5 contribuisce alla regolazione a feedback degli output trascrizionali indotti dalle citochine e al cross-talk con processi associati alla MAPK. Un’espressione o una funzione disregolata di SOCS5 è stata associata a segnalazione immunitaria aberrante ed è stata studiata in contesti di rimodellamento della segnalazione correlata al cancro e di meccanismi di malattie infiammatorie.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO SOCS-5 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene SOCS5 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del SOCS5 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto SOCS5 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina SOCS-5.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di SOCS5 per lo studio della segnalazione di SOCS-5, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni SOCS5 critici per la funzione di SOCS-5
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di SOCS5 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal SOCS-5 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal SOCS-5 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus SOCS5. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal SOCS-5 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR SOCS-5 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia SOCS5 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio SOCS5 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.