SLC35E3 Plasmide Double Nickase (h): sc-412539-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SLC35E3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SLC35E3 Double Nickase Plasmid (h) e il SLC35E3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SLC35E3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SLC35E3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-412539-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SLC35E3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-412539-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC35E3 codifica una proteina prevista simile a un trasportatore di nucleotidi-zucchero della famiglia dei trasportatori di soluti 35, che si ritiene partecipi alla gestione dei nucleotidi-zucchero all’interno della via secretoria, supportando processi associati alla glicosilazione nel reticolo endoplasmatico e nella rete del Golgi. Influenzando la disponibilità di donatori di zuccheri attivati, SLC35E3 può contribuire alla biosintesi dei glicani di proteine e lipidi, con possibili effetti sul traffico di membrana, sulle interazioni cellula–cellula e sulla maturazione dei recettori. L’alterazione della glicosilazione è ampiamente collegata alla regolazione immunitaria, a fenotipi dello sviluppo e a cambiamenti della segnalazione cellulare associati ai tumori, rendendo SLC35E3 un bersaglio utile per studiare la biologia dipendente dai glicani. L’analisi funzionale di SLC35E3 può aiutare a chiarire come la capacità di trasporto dei nucleotidi-zucchero si interfacci con l’omeostasi del Golgi e con le risposte cellulari allo stress.
SLC35E3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SLC35E3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SLC35E3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SLC35E3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SLC35E3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.