SLC35D1 Plasmide Double Nickase (h): sc-407065-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SLC35D1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SLC35D1 Double Nickase Plasmid (h) e il SLC35D1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SLC35D1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SLC35D1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-407065-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SLC35D1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-407065-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC35D1 codifica un trasportatore di zuccheri nucleotidici residente nel Golgi che scambia UDP-zuccheri attraverso le membrane intracellulari per sostenere la biosintesi di glicosaminoglicani e proteoglicani. Regolando la disponibilità luminale dei substrati per le glicosiltransferasi, SLC35D1 influenza l’assemblaggio della matrice extracellulare e i processi di sviluppo correlati alla cartilagine. Alterazioni della funzione di SLC35D1 sono state associate a difetti nella condrogenesi e nella morfogenesi scheletrica, in linea con il suo ruolo nella formazione di una matrice ricca di proteoglicani. Nei modelli cellulari, la perturbazione di SLC35D1 può essere utilizzata per indagare come il flusso di zuccheri nucleotidici controlli la segnalazione dipendente dalla glicosilazione e i fenotipi dipendenti dalla matrice.
SLC35D1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SLC35D1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SLC35D1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SLC35D1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SLC35D1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.