SLC35B4 Plasmide Double Nickase (h): sc-413728-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SLC35B4 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SLC35B4 Double Nickase Plasmid (h) e il SLC35B4 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SLC35B4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SLC35B4 Plasmide Double Nickase (h) | sc-413728-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SLC35B4 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-413728-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC35B4 codifica un trasportatore di zuccheri nucleotidici localizzato nel Golgi che importa UDP-xilosio e UDP-N-acetilglucosamina nel lume del Golgi per sostenere la glicosilazione e la biosintesi dei proteoglicani. Regolando la disponibilità di zuccheri nucleotidici, SLC35B4 influenza la composizione e la maturazione dei glicani sulle proteine secrete e di membrana, con effetti sulla segnalazione di superficie cellulare e sul traffico proteico. Alterazioni del trasporto di zuccheri nucleotidici e dei conseguenti pattern di glicosilazione sono state collegate a cambiamenti nella regolazione metabolica, nella crescita cellulare e nelle risposte allo stress, rendendo SLC35B4 un nodo rilevante per lo studio delle vie dipendenti dai glicani. Una glicosilazione disregolata è frequentemente associata a una biologia complessa delle malattie, inclusi disfunzioni metaboliche e fenotipi oncogenici, fornendo un contesto meccanicistico per modelli di ricerca.
SLC35B4 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SLC35B4 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SLC35B4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SLC35B4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SLC35B4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.