SerpinA6 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-407031

Panoramica

SERPINA6 codifica la SerpinA6, nota anche come globulina legante i corticosteroidi (corticosteroid-binding globulin), un membro secreto della famiglia degli inibitori delle serin-proteasi che regola principalmente la biodisponibilità sistemica dei glucocorticoidi legando e trasportando il cortisolo nel plasma. Tamponando i livelli di cortisolo libero, SerpinA6 influenza la segnalazione del recettore dei glucocorticoidi e i programmi trascrizionali a valle che modellano metabolismo, risposte immunitarie e fisiologia dello stress. Un’alterata espressione di SERPINA6 o varianti genetiche sono state associate a una disregolazione dell’attività dell’asse ipotalamo–ipofisi–surrene e a fenotipi correlati al cortisolo, inclusa la suscettibilità a caratteristiche metaboliche e infiammatorie. Nei sistemi sperimentali, SERPINA6 offre un punto di accesso per analizzare il crosstalk tra segnalazione endocrina, vie secretorie epatiche e omeostasi delle proteine extracellulari.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO SerpinA6 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene SERPINA6 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del SERPINA6 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto SERPINA6 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina SerpinA6.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di SERPINA6 per lo studio della segnalazione di SerpinA6, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni SERPINA6 critici per la funzione di SerpinA6
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di SERPINA6 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal SerpinA6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal SerpinA6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus SERPINA6. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal SerpinA6 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR SerpinA6 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia SERPINA6 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio SERPINA6 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.