Selenoprotein P Plasmide KO CRISPR/Cas9 (bovine2): sc-437342

Panoramica

La selenoproteina P (SELENOP) è una glicoproteina secreta, ricca di residui di selenocisteina, che nei mammiferi funge da principale fattore di trasporto e deposito del selenio, sostenendo la distribuzione sistemica del selenio e l’omeostasi redox. Contribuisce alla difesa antiossidante fornendo selenio per la biosintesi dei selenoenzimi, influenzando le risposte cellulari allo stress ossidativo, all’infiammazione e allo stress del reticolo endoplasmatico. Nella biologia bovina, SELENOP è rilevante per la secrezione epatica, la regolazione vascolare e metabolica e l’immunità dipendente dal selenio, collegando lo stato del selenio al danno ossidativo e alla segnalazione infiammatoria. Un’espressione deregolata di SELENOP o una disponibilità alterata di selenio è associata a modifiche della segnalazione redox e a squilibri metabolici, rendendola un utile punto di accesso molecolare per studiare le vie di adattamento allo stress e le interazioni tra nutrienti e geni.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Selenoprotein P (bovine2) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene in linee cellulari bovine. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Selenoprotein P.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di per lo studio della segnalazione di Selenoprotein P, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni critici per la funzione di Selenoprotein P
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Selenoprotein P CRISPR/Cas9 KO Plasmid (bovine) e dal Selenoprotein P CRISPR/Cas9 KO Plasmid (bovine2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus . Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Selenoprotein P Plasmide HDR (bovine) e il plasmide HDR Selenoprotein P (bovine2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.