Sec8 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422866

개요

Exoc4는 SNARE 의존적 융합에 앞서 분비 소포를 특정 형질막 부위에 연결(테더링)하는 8량체 엑소시스트(exocyst) 복합체의 필수 소단위인 Sec8을 암호화합니다. 마우스 세포에서 Sec8은 상피 극성, 신경돌기 성장, 세포질분열, 수용체 재순환 등의 과정에 필요한 극성화된 엑소사이토시스와 막 수송을 조율하는 데 기여하며, Ral, Rab, Cdc42를 포함한 소형 GTPase들의 신호를 통합합니다. 엑소시스트 기능은 세포골격 재구성과 방향성 세포 이동과도 밀접하게 연결되어 있어, Sec8은 조직 형성과 세포내 수송의 정확성을 제어하는 경로를 연구하기 위한 유용한 결절점입니다. 엑소시스트 의존적 수송의 조절 이상은 세포 극성의 변화 및 비정상적 신호 전달 역학과 연관되어, 발생 및 신경생물학 연구에서 중요한 의미를 갖습니다.

Sec8 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Exoc4 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Exoc4 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Exoc4의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Sec8 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Sec8 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Exoc4 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Sec8 기능에 중요한 Exoc4 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Exoc4 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Sec8 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Sec8 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Exoc4 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Sec8 HDR 플라스미드 (m) 및 Sec8 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Exoc4 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Exoc4 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.