Plasmide Double Nickase (h) SARM: sc-403427-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SARM correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SARM Double Nickase (h) et le plasmide SARM Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SARM1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SARM | sc-403427-NIC | 20 µg | $410.00 |
SARM1 code SARM, une protéine adaptatrice contenant une NADase qui constitue un exécuteur central de la dégénérescence axonale. À la suite d’une lésion neuronale ou d’un stress métabolique, l’activation de SARM1 déclenche une déplétion rapide du NAD⁺, un effondrement énergétique et le démantèlement cytosquelettique en aval, en s’intégrant à des voies qui régulent le maintien axonal, la fonction mitochondriale et la signalisation de l’immunité innée. Une activité dérégulée de SARM1 a été associée à des processus neurodégénératifs et neuro-inflammatoires, notamment des neuropathies périphériques et une perte axonale observées dans divers contextes de maladies neurologiques. En tant que nœud central de l’autodestruction axonale induite par les lésions, SARM1 est largement étudiée pour ses rôles dans la survie neuronale, la signalisation de la dégénérescence et les réponses de l’état cellulaire au stress.
SARM Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SARM1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SARM1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SARM1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SARM1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.