Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (m) RUNX3: sc-419487-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)RUNX3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa RUNX3 (m) y el plásmido de doble nickasa RUNX3 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Runx3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: RUNX3 Anticuerpo (A-3): sc-376591
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) RUNX3 | sc-419487-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) RUNX3 | sc-419487-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Runx3 codifica el factor de transcripción RUNX3, una proteína de unión al ADN con dominio Runt que se asocia con CBFβ para regular el compromiso de linaje, la diferenciación y la homeostasis tisular. En células de ratón, RUNX3 integra señales de las vías TGF-β/SMAD y Wnt/β-catenina para modular programas transcripcionales que controlan la progresión del ciclo celular, la apoptosis y el desarrollo de células inmunitarias. La actividad de Runx3 es particularmente relevante para la maduración de linfocitos citotóxicos y la diferenciación epitelial, donde la alteración de su expresión o función se asocia con proliferación desregulada y fenotipos inflamatorios. Estas propiedades hacen de Runx3 un nodo útil para analizar los circuitos transcripcionales y el entrecruzamiento de señales en sistemas modelo relevantes para el desarrollo y la enfermedad.
RUNX3 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Runx3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Runx3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Runx3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Runx3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.