Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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RUNX1 Plasmide Double Nickase (h): sc-400803-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- RUNX1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il RUNX1 Double Nickase Plasmid (h) e il RUNX1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira RUNX1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: RUNX1 Antibody (A-2): sc-365644
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
RUNX1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400803-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RUNX1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400803-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RUNX1 codifica un fattore di trascrizione della famiglia runt che forma, insieme a CBFB, un complesso di legame al DNA per controllare programmi di espressione genica specifici di linea durante l’ematopoiesi definitiva. Regola differenziamento, autorinnovamento e coordinamento del ciclo cellulare nelle cellule staminali e progenitrici ematopoietiche integrando segnali provenienti da vie quali TGF-β/BMP, Wnt e reti trascrizionali guidate da citochine. RUNX1 partecipa anche al rimodellamento della cromatina e alla selezione degli enhancer per stabilire stati trascrizionali mieloidi e linfoidi. La deregolazione di RUNX1 tramite mutazioni, traslocazioni o alterazioni dell’espressione è fortemente associata alla biologia delle neoplasie ematologiche e a uno sviluppo compromesso delle cellule del sangue, rendendolo un bersaglio centrale per studi meccanicistici sulla regolazione genica e su modelli di leucemogenesi.
RUNX1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus RUNX1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di RUNX1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di RUNX1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con RUNX1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.