Ribosomal Protein L24 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-417652-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Ribosomal Protein L24O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Ribosomal Protein L24 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Ribosomal Protein L24 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RPL24. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Ribosomal Protein L24 Anticorpo (C-5): sc-518250
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Ribosomal Protein L24 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-417652-NIC | 20 µg | $410.00 |
RPL24 codifica a proteína ribossômica L24, um componente essencial da subunidade ribossômica grande 60S que contribui para a montagem do ribossomo e o controle da tradução. Ao sustentar a capacidade de decodificação de mRNA e a síntese de polipeptídeos nascentes, RPL24 influencia processos centrais como crescimento celular, proteostase e programas traducionais adaptativos ao estresse. A perturbação de proteínas ribossômicas pode desencadear estresse nucleolar e ativar vias de vigilância, incluindo a sinalização de p53, ligando defeitos na biogênese ribossômica a alterações na regulação do ciclo celular. A produção desregulada de ribossomos e a tradução estão amplamente implicadas na transformação oncogênica e em fenótipos semelhantes aos de ribossomopatias, tornando RPL24 um nó relevante para estudos mecanísticos do controle traducional em células humanas.
Ribosomal Protein L24 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RPL24 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RPL24. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RPL24. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RPL24 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.