RhoC Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401242-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RhoCO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RhoC (h) e o Plasmídeo Double Nickase RhoC (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RHOC. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RhoC Anticorpo (C-10): sc-393090
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RhoC Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401242-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RhoC Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401242-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O RHOC codifica a pequena GTPase RhoC, um membro da família Rho que atua como um interruptor molecular, alternando entre os estados ligados a GDP e a GTP para regular a remodelação do citoesqueleto de actina. A sinalização de RhoC coordena a montagem de fibras de estresse, a dinâmica das adesões focais e a contratilidade celular por meio de efetores como ROCK e mDia, integrando-se a vias que controlam a polaridade e a motilidade celulares. Alterações na atividade de RHOC têm sido associadas a fenótipos invasivos em múltiplos contextos tumorais e a mudanças na organização do citoesqueleto que influenciam a disseminação metastática. Assim, o RHOC é amplamente utilizado como um nó para estudar redes de GTPases Rho, mecanotransdução e programas de sinalização relacionados à migração em células humanas.
RhoC O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RHOC em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RHOC. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RHOC. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RHOC interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.