RGS7 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406720

Panoramica

RGS7 (Regolatore della segnalazione delle proteine G 7) è una proteina che attiva la GTPasi e accelera la terminazione della segnalazione dei GPCR promuovendo l’idrolisi del GTP della subunità Gα, in particolare nelle vie accoppiate a Gi/o. Svolge un ruolo di rilievo nei complessi di segnalazione neuronali, spesso in associazione con Gβ5 e ancoraggi di membrana come R7BP, contribuendo a modellare la trasmissione sinaptica, la dinamica del cAMP e la modulazione dei canali ionici. Attraverso il controllo delle vie effettrici dei GPCR, RGS7 influenza le risposte ai neurotrasmettitori e i programmi di segnalazione dipendenti dall’attività nel sistema nervoso. La disregolazione della segnalazione legata a RGS7 è stata studiata nel contesto dei meccanismi di malattie neuropsichiatriche e neurodegenerative, in cui sono implicati un’alterata “tonicità” dei GPCR e l’omeostasi sinaptica.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO RGS7 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene RGS7 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del RGS7 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto RGS7 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina RGS7.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di RGS7 per lo studio della segnalazione di RGS7, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni RGS7 critici per la funzione di RGS7
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di RGS7 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal RGS7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal RGS7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus RGS7. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal RGS7 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR RGS7 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia RGS7 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio RGS7 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.