Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
REEP1 Plasmide Double Nickase (h): sc-407088-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- REEP1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il REEP1 Double Nickase Plasmid (h) e il REEP1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira REEP1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: REEP1 Antibody (A-8): sc-393242
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
REEP1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-407088-NIC | 20 µg | $410.00 |
REEP1 (receptor expression-enhancing protein 1) è una proteina di membrana del reticolo endoplasmatico (RE) implicata nel modellamento dei tubuli del RE e nel mantenimento della sua architettura nei neuroni. Partecipa alle interazioni tra RE e microtubuli e sostiene il traffico intracellulare di membrane e la crescita dei neuriti, processi strettamente collegati al mantenimento assonale e alla funzione sinaptica. Un’alterata attività di REEP1 è associata a fenotipi neurodegenerativi, in particolare alla paraplegia spastica ereditaria, evidenziandone la rilevanza nei pathway che governano l’integrità dei neuroni corticospinali. L’analisi sperimentale di REEP1 è quindi utile per studiare la morfogenesi del RE, la proteostasi e la dinamica degli organelli in modelli cellulari umani.
REEP1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus REEP1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di REEP1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di REEP1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con REEP1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.