RecQL5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406407-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RecQL5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RecQL5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase RecQL5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RECQL5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RecQL5 Anticorpo (C-9): sc-515050
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RecQL5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406407-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RecQL5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406407-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RECQL5 codifica o membro 5 da família de helicases RecQ, uma helicase de DNA que ajuda a preservar a estabilidade do genoma ao regular a dinâmica da replicação do DNA e coordenar o reparo de lesões no DNA. A RecQL5 interage com a RNA polimerase II e contribui para o controle da recombinação associada à transcrição, limitando eventos de crossing-over aberrantes e conflitos entre replicação e transcrição. Por atuar na regulação da recombinação homóloga, na manutenção da forquilha de replicação e nas respostas à sinalização de danos ao DNA, o RECQL5 é frequentemente estudado em vias que restringem a mutagênese e os rearranjos cromossômicos. Alterações na função de RECQL5 têm sido associadas a fenótipos de maior instabilidade genômica, relevantes para pesquisas mecanísticas sobre suscetibilidade ao câncer e distúrbios de manutenção do genoma.
RecQL5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RECQL5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RECQL5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RECQL5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RECQL5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.