Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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RANTES 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-401806-NIC
- Target species: human
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- RANTES Double Nickase Plasmid (h) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
- 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
- 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
- RANTES 더블 니케이스 플라스미드 (h) 및 RANTES 더블 니케이스 플라스미드 (h2)는 CCL5을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
- Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 RANTES Antibody (F-11): sc-514019
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
RANTES 더블 틈내기효소 플라스미드 (h) | sc-401806-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RANTES 더블 틈내기효소 플라스미드 (h2) | sc-401806-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCL5는 케모카인 RANTES를 암호화하며, RANTES는 분비형 리간드로서 주로 CCR1, CCR3, CCR5를 통해 신호를 전달하여 면역 활성화가 일어나는 부위로 T 세포, 단핵구, 호산구, NK 세포의 화학주성을 유도합니다. RANTES에 의해 유도되는 수용체 신호전달은 G 단백질 결합 수용체(GPCR) 경로를 활성화해 세포내 칼슘 유입/변동, PI3K/AKT 및 MAPK 연쇄 반응, 인테그린 활성화, 세포골격 재구성을 조절함으로써 백혈구의 동원과 조직 염증을 형성합니다. 사람의 생물학적 맥락에서 CCL5 발현은 염증성 전사 프로그램에 의해 엄격히 조절되며, 림프조직과 말초 조직에서 면역세포의 조율된 이동에 기여합니다. CCL5/RANTES 신호의 조절 이상은 만성 염증 질환, 자가면역 병리, 종양 미세환경에서의 면역세포 침윤과 연관되어 보고되어 왔으며, 면역 조절 기전 연구에서 흔히 표적으로 삼는 인자입니다.
RANTES 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 CCL5 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 CCL5 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 CCL5의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, CCL5 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.