Plásmido Doble Nickase (h) Ran BP-3: sc-405001-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Ran BP-3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Ran BP-3 (h) y el plásmido de doble nickasa Ran BP-3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a RANBP3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Ran BP-3 Anticuerpo (D-2): sc-377253
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Ran BP-3 | sc-405001-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Ran BP-3 | sc-405001-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RANBP3 codifica la proteína 3 de unión a Ran (Ran BP-3), un cofactor de exportación nuclear que participa en el transporte nucleocitoplasmático dependiente de RanGTP. Ran BP-3 interactúa con receptores de exportación para apoyar la exportación mediada por CRM1/XPO1 y contribuye a mantener una distribución núcleo–citoplasma adecuada de proteínas reguladoras y ARN. A través de su función en la dinámica del transporte, RANBP3 se vincula con vías que controlan programas transcripcionales, la progresión del ciclo celular y las respuestas al estrés. La desregulación de la maquinaria de exportación nuclear, incluidos factores que modulan la función de Ran y las exportinas, se asocia con alteraciones de la señalización y con fenotipos de inestabilidad genómica relevantes para el cáncer y otros contextos proliferativos o neurodegenerativos.
Ran BP-3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus RANBP3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de RANBP3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de RANBP3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con RANBP3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.