Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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RACK1 Plasmide Double Nickase (h): sc-400800-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- RACK1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il RACK1 Double Nickase Plasmid (h) e il RACK1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira RACK1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: RACK1 Antibody (B-3): sc-17754
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
RACK1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400800-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RACK1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400800-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il recettore per la chinasi C attivata 1 (RACK1, noto anche come GNB2L1) è una proteina scaffold conservata a ripetizioni WD che organizza complessi di segnalazione multiproteici a livello dei ribosomi e di complessi associati alla membrana. Coordina il crosstalk tra la segnalazione mediata da PKC, l’adesione mediata da integrine/FAK, le vie MAPK e il controllo della traduzione, influenzando così la crescita cellulare, la migrazione e le risposte allo stress. RACK1 è stato implicato nella regolazione del controllo di qualità associato al ribosoma e della traduzione selettiva degli mRNA, collegando gli input di segnalazione alla proteostasi. Alterazioni dell’espressione o della localizzazione di RACK1 sono spesso studiate nel contesto della segnalazione oncogenica, di fenotipi associati alla metastasi e delle interazioni virus–ospite che sfruttano il macchinario traslazionale dell’ospite.
RACK1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus RACK1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di RACK1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di RACK1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con RACK1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.