Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PYGB Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406294-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PYGBO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PYGB (h) e o Plasmídeo Double Nickase PYGB (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PYGB. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PYGB Anticorpo (B-5): sc-518267
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PYGB Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406294-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PYGB Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406294-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PYGB codifica a isoforma cerebral da glicogénio fosforilase, uma enzima limitante da velocidade que catalisa a degradação do glicogénio em glicose-1-fosfato, apoiando uma adaptação metabólica rápida durante períodos de elevada exigência energética. Ao controlar a mobilização do glicogénio intracelular, o PYGB influencia o fluxo glicolítico e estabelece uma ligação entre a disponibilidade de nutrientes e as respostas celulares ao stress, o equilíbrio redox e a homeostase de ATP. A atividade do PYGB está ligada a vias que regulam o metabolismo dos hidratos de carbono e pode modular a resiliência celular sob hipóxia ou limitação de nutrientes. O metabolismo do glicogénio desregulado e a expressão alterada de PYGB têm sido associados à reprogramação metabólica observada em contextos neurológicos e noutros tecidos, o que o torna um alvo útil para estudos mecanísticos da regulação energética.
PYGB O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PYGB em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PYGB. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PYGB. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PYGB interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.