PTTG2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-418367

概要

PTTG2（下垂体腫瘍形質転換遺伝子2）は、姉妹染色分体の分離や細胞周期の進行の制御に関与するとされるセキュリン様タンパク質をコードしており、体細胞分裂チェックポイントの制御やゲノム安定性の維持との関連が示されています。後期開始（アナフェーズ開始）や染色体分配に関わるプロテアーゼ活性を協調させる経路の一部として、PTTG2の発現変化は増殖、異数性、細胞ストレス応答に影響し得ます。PTTGファミリーのメンバーの制御異常は複数の腫瘍タイプで報告されており、がん化シグナル伝達の文脈や細胞周期駆動型の表現型におけるPTTG2の検討を支持します。そのため、ヒトPTTG2は、有糸分裂の機構、複製に伴う損傷、ならびに増殖状態に連動した転写プログラムの研究において重要な対象となります。

PTTG2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPTTG2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PTTG2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PTTG2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PTTG2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PTTG2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PTTG2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PTTG2の機能に不可欠なPTTG2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PTTG2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PTTG2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびPTTG2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PTTG2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PTTG2 HDRプラスミド（h）および PTTG2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPTTG2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPTTG2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。