PTH CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422490

개요

Mouse Pth는 부갑상선호르몬(PTH)을 암호화하며, PTH는 분비형 펩타이드로서 PTH1 수용체를 통해 신호를 전달해 뼈 재형성, 신장 세뇨관 재흡수, 인산 배설을 조절함으로써 전신의 칼슘 및 인산 항상성을 유지합니다. PTH에 의해 유도되는 GPCR 신호전달은 cAMP/PKA 및 PLC/PKC 경로를 활성화하고, RANKL과 OPG 같은 하위 매개인자를 통해 조골세포–파골세포의 연계(coupling)에도 영향을 미칩니다. 생리적 조건에서 Pth 발현은 순환 칼슘과 비타민 D 대사로부터의 피드백을 통합하여 무기질 이온 항상성을 조율합니다. PTH 신호의 이상 조절은 골 교체(turnover), 무기질 대사 장애, 그리고 신장–뼈 축(kidney–bone axis) 상호작용에 대한 내분비 조절 연구 전반과 폭넓게 관련됩니다.

PTH CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Pth 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Pth 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Pth의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PTH 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PTH 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Pth 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PTH 기능에 중요한 Pth 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Pth 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PTH CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 PTH CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Pth 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PTH HDR 플라스미드 (m) 및 PTH HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Pth 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Pth 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.