PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-400448

Panoramica

KLK3 codifica la peptidasi 3 correlata alle callicreine (PSA), una proteasi serinica secreta prodotta prevalentemente dalle cellule epiteliali luminali della prostata e rilasciata nel liquido seminale. Il PSA partecipa al processamento proteolitico delle proteine del plasma seminale e contribuisce a reti di proteasi extracellulari che modulano la scissione dei substrati, il turnover proteico e la segnalazione del microambiente. La sua espressione è fortemente regolata dalla segnalazione del recettore degli androgeni, collegando la trascrizione di KLK3 al controllo ormonale della differenziazione dell’epitelio prostatico e dei programmi secretori. L’espressione deregolata di KLK3 e l’attività alterata del PSA sono strettamente associate alla patobiologia prostatica e sono ampiamente utilizzate come readout molecolari negli studi sulla risposta agli androgeni, la progressione tumorale e il rimodellamento del microambiente.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene KLK3 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del KLK3 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto KLK3 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di KLK3 per lo studio della segnalazione di PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni KLK3 critici per la funzione di PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di KLK3 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus KLK3. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia KLK3 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio KLK3 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.