PRX VI Plasmide Double Nickase (h): sc-401549-NIC

PRDX6 codifica perossiredossina 6 (PRX VI), un enzima antiossidante bifunzionale con attività di glutatione perossidasi e fosfolipasi A2, che contribuiscono a mantenere l’equilibrio redox cellulare e l’omeostasi dei fosfolipidi di membrana. Limitando l’accumulo di perossido di idrogeno e idroperossidi lipidici, PRX VI modula la segnalazione dello stress ossidativo, le risposte infiammatorie e le vie di sopravvivenza cellulare, inclusi processi legati alla funzione mitocondriale e al metabolismo lipidico. Un’alterata espressione o attività di PRDX6 è stata associata a una gestione disfunzionale delle specie reattive dell’ossigeno e alla perossidazione lipidica, caratteristiche comunemente osservate nei disturbi infiammatori, nelle patologie neurodegenerative e nella biologia del cancro. In quanto nodo di riparazione redox e lipidica, PRX VI è spesso studiata in modelli di danno ossidativo, suscettibilità alla ferroptosi e segnalazione adattativa allo stress.

PRX VI Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus PRDX6 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di PRDX6. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di PRDX6. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con PRDX6 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.