PRX IV Plasmide Double Nickase (h): sc-402821-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- PRX IV Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il PRX IV Double Nickase Plasmid (h) e il PRX IV Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira PRDX4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: PRX IV Antibody (F-2): sc-376668
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
PRX IV Plasmide Double Nickase (h) | sc-402821-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PRX IV Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402821-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **PRDX4** codifica la **perossiredossina IV (PRX IV)**, una perossidasi tiolo-dipendente del reticolo endoplasmatico e della via secretoria che riduce il perossido di idrogeno e i perossidi lipidici per mantenere l’omeostasi redox. Accoppiando la detossificazione dei perossidi alla formazione di ponti disolfuro, PRX IV sostiene il ripiegamento ossidativo delle proteine, la proteostasi del RE e l’attenuazione della segnalazione della risposta alle proteine mal ripiegate (UPR) in condizioni di stress ossidativo. L’attività di PRDX4 interseca vie regolate dal redox che controllano secrezione, infiammazione e sopravvivenza cellulare, e alterazioni dell’espressione o dello stato di ossidazione sono state associate a fenotipi da stress ossidativo riportati in ambiti quali la biologia dei tumori, la disfunzione metabolica e contesti cardiovascolari e infiammatori. In quanto enzima redox secreto/del RE, PRX IV viene spesso studiato per il suo impatto sul tamponamento delle specie reattive dell’ossigeno (ROS) extracellulari e luminali e sulla conseguente modulazione di programmi trascrizionali di adattamento allo stress.
PRX IV Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus PRDX4 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di PRDX4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di PRDX4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con PRDX4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.