Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PP2A-Cβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400937
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PP2A-Cβ O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PP2A-Cβ, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PP2A-Cα/β Anticorpo (1D6): sc-80665
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PP2A-Cβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400937 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PPP2CB codifica a subunidade catalítica beta da fosfatase proteica 2A (PP2A-Cβ), uma importante fosfatase de serina/treonina que forma holoenzimas heterotriméricas de PP2A com diversas subunidades regulatórias do tipo B, controlando a especificidade de substrato e a localização subcelular. A PP2A-Cβ contrabalança a sinalização de quinases ao desfosforilar nós-chave em vias que regulam a progressão do ciclo celular, as respostas a danos no DNA e a sinalização de estresse, incluindo AKT/MAPK e múltiplos reguladores mitóticos. Por meio dessas atividades, a PP2A ajuda a manter a homeostase de fosforilação que afeta programas transcricionais, a dinâmica do citoesqueleto e o controle metabólico. A sinalização desregulada de PP2A e alterações na expressão ou na regulação de PPP2CB têm sido associadas a proliferação aberrante e sinalização de sobrevivência, com relevância para a oncologia e para estudos em neurobiologia de redes de sinalização dependentes de fosfatases.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PP2A-Cβ (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PPP2CB em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PPP2CB, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PPP2CB na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PP2A-Cβ.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PPP2CB para a investigação da sinalização de PP2A-Cβ, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PPP2CB críticos para a função PP2A-Cβ
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PPP2CB para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PP2A-Cβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PP2A-Cβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PPP2CB. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PP2A-Cβ Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PP2A-Cβ (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PPP2CB para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PPP2CB definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.