Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Pol I/II/III RPB8 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-406520
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Pol I/II/III RPB8 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Pol I/II/III RPB8基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Pol I/II/III RPB8: sc-398512，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Pol I/II/III RPB8 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-406520 | 20 µg | $397.00 |
概述
POLR2H 编码 RPB8，这是一种体积小且高度保守的亚基，由 RNA 聚合酶 I、II 和 III 共同拥有，参与聚合酶的组装、稳定性以及转录活性维持。RPB8 通过参与 rRNA 合成（Pol I）、mRNA 转录（Pol II）以及 tRNA/5S rRNA 生成（Pol III），支持将转录与核糖体生物发生、细胞周期调控和蛋白质稳态相耦联的核心基因表达程序。基础转录机器活性与核仁应激通路的改变可重塑全局转录产出及其下游信号传导，使 POLR2H 成为在疾病相关背景下研究转录脆弱性与全基因组表达重编程的有用节点。其在多种聚合酶系统中的必需作用也提供了一个机制切入点，用以探究一般转录因子与染色质状态如何在不同聚合酶系统之间实现协同调控。
Pol I/II/III RPB8 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中POLR2H基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对POLR2H基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏POLR2H开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Pol I/II/III RPB8蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建POLR2H缺失的细胞模型，用于Pol I/II/III RPB8信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Pol I/II/III RPB8 功能至关重要的 POLR2H 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 POLR2H 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Pol I/II/III RPB8 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 Pol I/II/III RPB8 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 POLR2H 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Pol I/II/III RPB8 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 Pol I/II/III RPB8 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由POLR2H同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定POLR2H靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。