plexin-A3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422320

Descripción general

Plxna3 codifica la plexina-A3, un receptor transmembrana para las semaforinas de clase 3 que regula la guía axonal, la migración neuronal y el patrón de las dendritas mediante la señalización semaforina–neuropilina–plexina. La plexina-A3 integra señales que remodelan el citoesqueleto de actina y microtúbulos a través de GTPasas de la familia Rho y efectores asociados, influyendo en el colapso del cono de crecimiento y la motilidad direccional. Más allá del sistema nervioso, la plexina-A3 se ha relacionado con el control de la adhesión y el movimiento celular, procesos relevantes para el patrón del desarrollo y la organización tisular. La desregulación de las vías de semaforina/plexina se ha asociado con alteraciones del neurodesarrollo y fenotipos migratorios modificados en modelos relevantes para enfermedades.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO plexin-A3 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Plxna3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Plxna3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Plxna3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína plexin-A3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Plxna3 para la investigación de la señalización de plexin-A3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Plxna3 críticos para la función de plexin-A3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Plxna3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido plexin-A3 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido plexin-A3 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Plxna3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR plexin-A3 (m) y el plásmido HDR plexin-A3 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Plxna3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Plxna3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.