Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
PI 3-kinase p110β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400541
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PI 3-kinase p110β O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PI 3-kinase p110β, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PI 3-kinase p110β Anticorpo (C-8): sc-376641
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PI 3-kinase p110β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400541 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PIK3CB codifica a subunidade catalítica p110β da fosfoinositídeo 3-quinase (PI3K) de classe I, que fosforila o PIP2 para gerar PIP3 e propagar sinais a jusante de AKT–mTOR e de outros nós efetores. A PI3K p110β desempenha um papel de destaque na sinalização iniciada por receptores tirosina-quinase e por GPCRs, integrando estímulos que regulam proliferação, sobrevivência, metabolismo, dinâmica do citoesqueleto e tráfego vesicular. Em células humanas, a atividade alterada da via de PI3K é frequentemente associada à sinalização oncogênica, a mecanismos de resistência a terapias e a respostas imunes e inflamatórias aberrantes. A função de PIK3CB também é relevante para a sinalização de insulina/IGF e para programas de motilidade celular, tornando-o um nó amplamente estudado no mapeamento de vias e na genômica funcional.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PI 3-kinase p110β (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PIK3CB em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PIK3CB, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PIK3CB na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PI 3-kinase p110β.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PIK3CB para a investigação da sinalização de PI 3-kinase p110β, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PIK3CB críticos para a função PI 3-kinase p110β
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PIK3CB para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PI 3-kinase p110β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PI 3-kinase p110β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PIK3CB. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PI 3-kinase p110β Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PI 3-kinase p110β (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PIK3CB para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PIK3CB definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.