Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PDK3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404502-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PDK3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PDK3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase PDK3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PDK3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PDK3 Anticorpo (A-4): sc-365378
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PDK3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404502-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PDK3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404502-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PDK3 codifica a isoforma 3 da quinase da piruvato desidrogenase, uma quinase mitocondrial de Ser/Thr que fosforila e inibe o complexo piruvato desidrogenase, limitando assim a conversão de piruvato em acetil-CoA e desviando o fluxo de carbono para fora do ciclo do TCA. Por meio desse ponto de controle, a PDK3 integra a disponibilidade de nutrientes e a sinalização de hipóxia com a oxidação da glicose, a produção de lactato e a bioenergética mitocondrial em sentido amplo. A atividade desregulada da PDK3 tem sido associada a reprogramação metabólica patológica e a alterações no balanço redox, com relatos de associação ao metabolismo de células cancerosas e a distúrbios neuromusculares e de nervos periféricos. Como reguladora do metabolismo oxidativo, a PDK3 é frequentemente estudada em contextos que envolvem respostas ao estresse mitocondrial, dependência glicolítica e adaptação metabólica.
PDK3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PDK3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PDK3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PDK3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PDK3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.