Nup37 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409458

Descripción general

NUP37 codifica Nup37, un componente esencial del subcomplejo Nup107–160 del complejo del poro nuclear, que contribuye a mantener la integridad de la envoltura nuclear y al transporte nucleocitoplasmático selectivo. Al participar en el ensamblaje del poro nuclear y en su función de compuerta, Nup37 influye en la exportación de ARN, la importación de proteínas y la regulación espacial de programas transcripcionales que dependen de un tráfico nuclear adecuado. La alteración de la composición del poro nuclear puede perturbar la estabilidad del genoma y la progresión mitótica, procesos que con frecuencia se encuentran modificados en contextos de enfermedades proliferativas. Por ello, NUP37 se estudia habitualmente en vías que conectan el transporte nuclear, el control del ciclo celular y la señalización sensible al estrés.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Nup37 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen NUP37 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del NUP37 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de NUP37 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Nup37.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en NUP37 para la investigación de la señalización de Nup37, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de NUP37 críticos para la función de Nup37
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de NUP37 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Nup37 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Nup37 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus NUP37. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Nup37 (h) y el plásmido HDR Nup37 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología NUP37 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana NUP37 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.