Nup153 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-403206
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Nup153 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico Nup153, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Nup153 Antibody (R3G1): sc-101544
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Nup153 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-403206 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
NUP153 codifica Nup153, una nucleoporina strutturale (scaffold) del complesso del poro nucleare che contribuisce all’architettura del cestello nucleare e regola il trasporto nucleocitoplasmatico. Nup153 partecipa all’assemblaggio e al disassemblaggio del poro nucleare durante il ciclo cellulare, interagisce con le vie mediate da importine/esportine e contribuisce a coordinare l’organizzazione della cromatina e la regolazione trascrizionale alla periferia del nucleo. Attraverso queste funzioni, Nup153 influenza il processamento dell’RNA e il mantenimento del genoma controllando l’accesso al nucleo di fattori regolatori. Alterazioni della funzione delle nucleoporine, inclusa la perturbazione del trasporto associato a NUP153 e della dinamica dell’involucro nucleare, sono state collegate a meccanismi rilevanti per la biologia dei tumori e per fenotipi neuroevolutivi in studi cellulari e genetici.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Nup153 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene NUP153 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del NUP153 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto NUP153 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Nup153.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di NUP153 per lo studio della segnalazione di Nup153, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni NUP153 critici per la funzione di Nup153
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di NUP153 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal Nup153 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal Nup153 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus NUP153. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal Nup153 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR Nup153 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia NUP153 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio NUP153 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.