Nucleoredoxin Plasmide Double Nickase (h): sc-413004-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Nucleoredoxin Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Nucleoredoxin Double Nickase Plasmid (h) e il Nucleoredoxin Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira NXN. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Nucleoredoxin Antibody (E-12): sc-393748
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Nucleoredoxin Plasmide Double Nickase (h) | sc-413004-NIC | 20 µg | $410.00 |
NXN umano codifica la nucleoredoxina, un’ossidoreduttasi della famiglia delle tioredossine che collega lo stato redox cellulare agli output di segnalazione catalizzando modificazioni redox reversibili delle cisteine su proteine bersaglio. La nucleoredoxina è stata associata alla regolazione della segnalazione Wnt/β-catenina attraverso un controllo redox-dipendente delle interazioni di Dishevelled, influenzando così programmi trascrizionali coinvolti in proliferazione, differenziamento e omeostasi tissutale. Contribuisce inoltre alle risposte allo stress ossidativo e al controllo redox-sensibile della funzione proteica nel citosol e nei complessi associati. L’attività di NXN deregolata e l’alterazione della segnalazione redox sono state studiate nel contesto di infiammazione, neurobiologia, stress metabolico e rimodellamento di vie legate al cancro, rendendolo un nodo utile per studi meccanicistici delle reti di segnalazione regolate dal redox.
Nucleoredoxin Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus NXN nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di NXN. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di NXN. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con NXN interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.