NPDC-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412710

Descripción general

NPDC1 (proteína 1 de proliferación, diferenciación y control neuronal) codifica NPDC-1, una proteína citoplasmática enriquecida en contextos neuronales y vinculada a la regulación de la progresión del ciclo celular y de programas de diferenciación. Se ha descrito que NPDC-1 modula redes transcripcionales mediante interacciones con receptores nucleares y otros factores reguladores, influyendo así en las transiciones de proliferación a diferenciación y en fenotipos asociados a las neuritas. En consonancia con estas funciones, la alteración de la expresión de NPDC1 se ha asociado con cambios en el control del crecimiento y en los estados de maduración celular en modelos relevantes para la neurobiología. Por ello, NPDC1 se estudia en vías que gobiernan la restricción del ciclo celular, el compromiso de linaje y la regulación del crecimiento dependiente del contexto, con implicaciones para la investigación del neurodesarrollo y la biología tumoral.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO NPDC-1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen NPDC1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del NPDC1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de NPDC1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NPDC-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en NPDC1 para la investigación de la señalización de NPDC-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de NPDC1 críticos para la función de NPDC-1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de NPDC1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido NPDC-1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido NPDC-1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus NPDC1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NPDC-1 (h) y el plásmido HDR NPDC-1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología NPDC1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana NPDC1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.