Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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NMD3 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406373
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- NMD3 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico NMD3, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: NMD3 Antibody (A-5): sc-515426
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
NMD3 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-406373 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
NMD3 codifica un fattore essenziale della biogenesi dei ribosomi che funge da adattatore per l’esportazione delle subunità ribosomali pre-60S dal nucleo al citoplasma. Coordinandosi con la via di esportazione CRM1/XPO1 e con gli eventi di rimodellamento durante le fasi tardive della maturazione della 60S, NMD3 contribuisce a garantire l’assemblaggio efficiente di ribosomi competenti per la traduzione e il mantenimento della proteostasi. L’alterazione dell’esportazione ribosomale dipendente da NMD3 può innescare risposte di stress nucleolare e modificare la progressione del ciclo cellulare attraverso effetti a valle sulla traduzione globale. Poiché la biogenesi dei ribosomi è strettamente legata al controllo della crescita, una regolazione anomala di questo processo è rilevante per lo studio dei meccanismi di malattia associati a proliferazione e stress, incluse le ribosomopatie e la riprogrammazione della traduzione associata al cancro.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO NMD3 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene NMD3 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del NMD3 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto NMD3 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina NMD3.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di NMD3 per lo studio della segnalazione di NMD3, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni NMD3 critici per la funzione di NMD3
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di NMD3 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal NMD3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal NMD3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus NMD3. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal NMD3 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR NMD3 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia NMD3 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio NMD3 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.