Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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NKp44 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-407295
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- NKp44 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico NKp44, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: NKp44 Antibody (8F12): sc-59342
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
NKp44 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-407295 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
NCR2 codifica NKp44 (CD336), un recettore attivante delle cellule natural killer (NK) che viene indotto in seguito all’attivazione delle NK e segnala tramite associazione con l’adattatore TYROBP (DAP12), dotato di motivo ITAM. Il legame di NKp44 con ligandi cellulari o associati a patogeni promuove la degranulazione delle cellule NK e la secrezione di citochine, inserendosi nei circuiti di sorveglianza immunitaria innata che modulano le risposte citotossiche. L’espressione di NCR2 e la segnalazione mediata da NKp44 sono state studiate in contesti di disregolazione immunitaria, inclusi microambienti infiammatori e alterazioni della funzione delle cellule NK in ambito oncologico e nelle infezioni croniche. In quanto recettore di superficie a espressione inducibile, NKp44 è anche utilizzato per analizzare gli stati di attivazione delle cellule NK e il cross-talk recettoriale con altri recettori NK.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO NKp44 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene NCR2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del NCR2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto NCR2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina NKp44.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di NCR2 per lo studio della segnalazione di NKp44, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni NCR2 critici per la funzione di NKp44
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di NCR2 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal NKp44 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal NKp44 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus NCR2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal NKp44 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR NKp44 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia NCR2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio NCR2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.