Neuron navigator 2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-429641

Panoramica

Nav2 codifica neuron navigator 2, una proteina associata al citoscheletro, arricchita nei neuroni, implicata nell’estensione dei neuriti, nella guida assonale e nella migrazione neuronale attraverso il coordinamento della dinamica dei microtubuli e del comportamento del cono di crescita. Nel sistema nervoso murino in sviluppo e in quello adulto, NAV2 è collegata a processi che modellano la formazione dei circuiti neurali, inclusi l’instaurarsi della polarità e la crescita direzionata in risposta a segnali di guida. Vie di segnalazione associate a NAV2 alterate sono state studiate nel contesto di fenotipi del neurosviluppo e di disfunzioni del sistema nervoso, in cui la connettività compromessa e un patterning assonale alterato rappresentano caratteristiche centrali. Di conseguenza, Nav2 è un bersaglio utile per indagare i meccanismi della morfogenesi neuronale e del rimodellamento del citoscheletro in modelli cellulari rilevanti per la malattia.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Neuron navigator 2 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Nav2 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Nav2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Nav2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Neuron navigator 2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Nav2 per lo studio della segnalazione di Neuron navigator 2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Nav2 critici per la funzione di Neuron navigator 2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Nav2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Neuron navigator 2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Neuron navigator 2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Nav2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Neuron navigator 2 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Neuron navigator 2 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Nav2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Nav2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.