Neuron navigator 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-429641

Visão geral

Nav2 codifica a neuron navigator 2, uma proteína associada ao citoesqueleto e enriquecida em neurônios, implicada na extensão de neuritos, na orientação axonal e na migração neuronal por meio da coordenação da dinâmica dos microtúbulos e do comportamento do cone de crescimento. No sistema nervoso de camundongos em desenvolvimento e na fase adulta, a NAV2 está ligada a processos que moldam a formação de circuitos neurais, incluindo o estabelecimento de polaridade e o crescimento direcionado em resposta a sinais de orientação. Vias associadas à NAV2 alteradas têm sido estudadas no contexto de fenótipos do neurodesenvolvimento e de disfunções do sistema nervoso, em que conectividade perturbada e padrões axonais desorganizados são características centrais. Como resultado, Nav2 é um alvo útil para investigar mecanismos de morfogênese neuronal e remodelamento do citoesqueleto em modelos celulares relevantes para doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Neuron navigator 2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Nav2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Nav2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Nav2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Neuron navigator 2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Nav2 para a investigação da sinalização de Neuron navigator 2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Nav2 críticos para a função Neuron navigator 2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Nav2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Neuron navigator 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Neuron navigator 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Nav2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Neuron navigator 2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Neuron navigator 2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Nav2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Nav2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.