Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) Nanog: sc-418033-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Nanog correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Nanog Double Nickase (h) et le plasmide Nanog Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant NANOG. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Nanog Antibody (1E6C4): sc-293121
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Nanog | sc-418033-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Nanog | sc-418033-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NANOG code Nanog, un facteur de transcription à homéoboîte, qui joue un rôle central dans le maintien de la pluripotence humaine et de l’auto-renouvellement en coordonnant des réseaux transcriptionnels avec OCT4/POU5F1 et SOX2. Nanog influence les décisions de destinée cellulaire en régulant l’état de la chromatine et les programmes d’expression génique associés à la pluripotence, en s’intégrant à des signaux tels que les voies TGF-β/SMAD, WNT/β-caténine et FGF/ERK. Une expression dérégulée de NANOG est associée à une différenciation aberrante, à une instabilité épigénétique et à des états transcriptionnels de type « cellules souches » observés dans des troubles du développement et divers cancers. Par conséquent, NANOG est largement étudié comme marqueur et régulateur fonctionnel des cellules souches pluripotentes, de la reprogrammation et de la plasticité des cellules tumorales.
Nanog Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus NANOG dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de NANOG. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de NANOG. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de NANOG.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.