Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
NALP1A CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-431476
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- NALP1A CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在NALP1A基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
NALP1A CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-431476 | 20 µg | $397.00 |
概述
小鼠 Nlrp1a 基因编码 NALP1A，这是一种位于细胞质的 NOD 样受体，作为炎症小体传感器发挥作用，将细胞应激的检测与先天免疫信号传导连接起来。NALP1A 被激活后，可促进炎症小体复合物的组装，从而驱动 caspase-1 的活化，并促使 IL-1β、IL-18 等促炎性细胞因子的成熟，进而把危险信号感知与细胞焦亡（pyroptosis）程序耦联起来。该通路与 NF-κB 预激活（priming）、线粒体应激反应以及更广泛的模式识别受体网络相互衔接，共同调控组织炎症。炎症小体信号失调与炎症性和自身免疫表型相关，并在宿主—病原体相互作用及无菌性炎症触发因素的研究中被广泛关注。
NALP1A CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Nlrp1a基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Nlrp1a基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Nlrp1a开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使NALP1A蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Nlrp1a缺失的细胞模型，用于NALP1A信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 NALP1A 功能至关重要的 Nlrp1a 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Nlrp1a 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 NALP1A CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 NALP1A CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Nlrp1a 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 NALP1A HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 NALP1A HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Nlrp1a同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Nlrp1a靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。