Myosin X CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-402204

Übersicht

Humanes **MYO10** kodiert **Myosin X**, einen unkonventionellen, aktinbasierten Motor, der an den Spitzen von Filopodien lokalisiert und die Initiierung, Verlängerung sowie den Transport von Fracht in Filopodien reguliert. Myosin X verknüpft Aktin-Remodeling mit Integrin-Trafficking und der Dynamik der Zell‑Matrix‑Adhäsion und unterstützt dadurch gerichtete Migration, Neuritenauswachsung und morphogenetische Prozesse. Durch die Koordination mit zytoskelettalen Regulatoren und Membrantransportwegen beeinflusst **MYO10** Prozesse wie Endozytose, die Bildung von Zellfortsätzen und die Reaktionsfähigkeit auf Leit-/Guidance-Signale. Eine fehlregulierte Expression oder Funktion von **MYO10** wurde in krankheitsrelevanten Modellen mit veränderter Zellmotilität und invasivem Verhalten in Verbindung gebracht, was es für die Untersuchung von Mechanismen nützlich macht, die zytoskelettale Organisation mit Signalübertragung koppeln.

Das Myosin X CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des MYO10-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des MYO10-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von MYO10 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Myosin X-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von MYO10-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Myosin X-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf MYO10-Exone abzielen, die für die Myosin X-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere MYO10-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Myosin X CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Myosin X CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des MYO10-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Myosin X HDR-Plasmid (h) und Myosin X HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von MYO10-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten MYO10-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.